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3D培养技术
肠类器官( Intestinal organoid)高通量模型


利用康宁96孔球形板,并结合Matrigel,我们用人诱导多能干细胞(hiPSC)培养出胃肠道类器官,并在每个孔中产生单个肠类器官,该模型可以用于高通量筛选。

 

方法

采用人胚胎干细胞验证的Matrigel (康宁货号354277) 在6孔板中培养hiPSC,收获hiPSC接种到96孔球形板(康宁货号4515)中。

  • 第1天,hiPSC迅速形成了每孔均一的拟胚体。继续培养,在条件培养基和信号分子的作用下,拟胚体向内胚层分化,形成内胚层类器官。

  • 第10天,将Matrigel (康宁货号354234) 加入球形板每孔中,并更换培养基为肠道培养基,内胚层类器官向肠道类器官分化。

  • 第24天,向球形板中继续添加Matrigel (SKU#354234) ,以促进肠道类器官的形成。

  • 第38天,染色和Marker检测确认肠道类器官的形成。


结果

96孔球形板中每个孔都形成一个独立的肠道类器官,如下图所示


更多详细信息,请至“下载资料”板块浏览应用文档“A Novel Method for Generating Single, Intestinal Organoids for High Throughput Screening”。